超高效液相色譜儀采用氣相色譜儀進(jìn)行分析的方法稱為氣相色譜法。氣相色譜法的原理是:樣品溶液進(jìn)樣后,首先進(jìn)入汽化室,然后在載氣的傳送作用下進(jìn)入色譜柱(載氣常用氮?dú)饣蚝猓?,不同組分在色譜柱中被分離,最后依次流出色譜柱,被檢測器檢測,得到其含量。
超高效液相色譜儀的實(shí)驗(yàn)原理:
超高效液相色譜分離是利用試樣中各組分在色譜柱中的淋洗液和固定相間的分配系數(shù)不.同,當(dāng)試樣隨著流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱中后,組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配(吸附一脫附一放出)由于固定相對各種組分的吸附能力不同(即保存作用不同),因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同,經(jīng)過一定的柱長后, 便彼此分離,順序離開色譜柱進(jìn)入檢測器,產(chǎn)生的離子流信號經(jīng)放大后,在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。
結(jié)構(gòu)及功能:
1、數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng):對色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,并參與HPLC儀器的自動(dòng)控制;
2、分離系統(tǒng):色譜柱:對樣品進(jìn)行分離,是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟,它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果;
3、檢測系統(tǒng):檢測器:將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號,被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收,得到樣品分離的色譜圖;
4、進(jìn)樣系統(tǒng):進(jìn)樣器:是將樣品送入色譜柱的裝置,進(jìn)樣方式可以分為兩種:閥進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。比較常用的是采用自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣;
5、溶劑輸送系統(tǒng):
a、儲(chǔ)液器:用來貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動(dòng)相。配有溶劑過濾器,以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi);
b、脫氣器:脫氣的目的是為了防止流動(dòng)相從色譜柱內(nèi)流出時(shí)釋放出氣泡進(jìn)入檢測器,從而引起噪聲,不能正常檢測;
c、輸液泵:將儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相連續(xù)不斷地以高壓形式進(jìn)入液路系統(tǒng),使樣品在色譜柱中完成分離過程;
d、梯度洗脫裝置:是在分離過程中通過逐漸改變流動(dòng)相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
儀器操作:
1、開機(jī),啟動(dòng)裝置,進(jìn)入Win2000;開啟LC,點(diǎn)擊Instrumentl online圖標(biāo), 進(jìn)入儀器控制面板,設(shè)置所需各項(xiàng)參數(shù)。
2、設(shè)置分析用流動(dòng)相清洗流路,等待色譜柱、系統(tǒng)的平衡,基線穩(wěn)定,開始進(jìn)樣分析。
3、分析結(jié)束,數(shù)據(jù)處理,打印報(bào)告。
4、關(guān)閉柱溫箱和檢測器,沖洗色譜柱,關(guān)閉脫氣機(jī)、泵,關(guān)閉整個(gè)裝置。
5、關(guān)閉總電源。
6、在記錄本上記錄使用情況。