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如何延長液相色譜分析柱的使用壽命

更新時間:2015-04-24        閱讀:2857
   我們知道,液相色譜儀的分離是在液相色譜分析柱中實現(xiàn)的。目前工作中多采用反相色譜柱,如何保護好分離柱,減少柱的污染是延長液相色譜分離柱壽命的關(guān)鍵。

  一、如何維護液相色譜分析柱

  1.加保護柱(預(yù)柱)是保護色譜柱的有效辦法。保護柱是根內(nèi)裝填料與分離柱性質(zhì)相近的短柱,接在分離柱之前,或代替流路過濾器。保護柱的作用是收集和阻塞分離柱口的化學(xué)垃圾,這些垃圾如果直接進入分離柱會逐漸堆積在柱頭,zui終降低柱效能。保護柱是消耗品,如分析血漿樣品,一般分析50個樣品后需更換新柱芯。

  2.避免高壓沖擊液相色譜分析柱。一般色譜柱都能承受得起高壓,但經(jīng)不住突然變化的高壓沖擊,這將改變柱床體積,影響柱效。引起高壓沖擊的原因主要有:進樣器的樣品閥的緩慢轉(zhuǎn)動、泵啟動太快、柱切換等操作。用手動進樣閥時的壓力變化不大,自動進樣閥由于切換較慢,可能會造成壓力沖擊。

  3.合理選擇液相色譜分析柱。我們知道,選擇色譜分離柱主要根據(jù)兩點,一是根據(jù)待測組分的分子量的大小;二是根據(jù)流動相條件,包括PH值、離子強度和溶劑極性等。

  4.定期沖洗液相色譜分離柱。每次分析工作結(jié)束時,沖洗完緩沖鹽后,zui后要過度到用強溶劑沖洗柱子,如可用色譜純甲醇、乙腈沖洗反相C18柱,目的是沖去吸附在柱上的強保留組分。如果用甲醇/水為流動相也應(yīng)這樣沖洗柱子,在一定程度上可恢復(fù)柱效。

  二、怎樣減少液相色譜分析柱的污染

  zui有效的辦法是純化樣品。我們在多年的分析工作中發(fā)現(xiàn),凡是樣品純化的越干凈,分離柱的壽命就越長;反之,只有提取沒有純化的樣品,分離柱柱效下降較快。建立一個理想的色譜分析方法應(yīng)該有一套有效的樣品前處理方法,特別是在分析血漿和尿液樣品時,要特別注意樣品的提取與純化,盡量使處理過的樣品中雜質(zhì)(如大分子蛋白、有機物等)降到zui低,保護柱頭和柱子。

  提取純化好的樣品用流動相來溶解,一方面減少色譜圖中的溶劑峰干擾,另一方面也是檢查樣品在流動相中的溶解性,如果樣品進樣后在流動相中沉淀,會堵塞進樣器和柱頭,甚至樣品分解,出現(xiàn)怪峰。如果出現(xiàn)樣品與流動相不溶要設(shè)法改變?nèi)芙鈼l件,如更換樣品溶劑,或改進處理樣品的方法,或過濾,去除不溶性物質(zhì)。

  延長液相色譜分析柱的使用壽命,我們可以從保護分離柱和減少污染兩個方面入手。

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