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怎么看液相色譜儀的技術(shù)指標(biāo)是否優(yōu)異?

更新時(shí)間:2022-05-17        閱讀:1988
液相色譜儀的技術(shù)指標(biāo)很多,有泵的、檢測(cè)器的、色譜柱等等。怎么看這些指標(biāo)優(yōu)異與否?建議從以下幾個(gè)方面考慮:

1)噪音和漂移:在儀器穩(wěn)定之后,記錄基線1小時(shí),基線帶寬為噪音,基線在1小時(shí)內(nèi)的變化為漂移。它們反映檢測(cè)器電子元件的穩(wěn)定性,及其受溫度和電源變化的影響,如果有流動(dòng)相從色譜柱流入檢測(cè)器,那么它們還反映流速(泵的脈動(dòng))和溶劑(純度、含有氣泡、固定相流失)的影響。噪音和漂移都會(huì)影響測(cè)定的準(zhǔn)確度,應(yīng)盡量減小。

2)靈敏度:表示一定量的樣品物質(zhì)通過(guò)檢測(cè)器時(shí)所給出的信號(hào)大小。對(duì)濃度型檢測(cè)器,它表示單位濃度的樣品所產(chǎn)生的電信號(hào)的大小,單位為mV·ml/g。對(duì)質(zhì)量型檢測(cè)器,它表示在單位時(shí)間內(nèi)通過(guò)檢測(cè)器的單位質(zhì)量的樣品所產(chǎn)生的電信號(hào)的大小,單位為mV·s/g。

3)檢測(cè)限:檢測(cè)器靈敏度的高低,并不等于它檢測(cè)最小樣品量或最低樣品濃度能力的高低,因?yàn)樵诙x靈敏度時(shí),沒(méi)有考慮噪聲的大小,而檢測(cè)限與噪聲的大小是直接有關(guān)的。

檢測(cè)限指恰好產(chǎn)生可辨別的信號(hào)(通常用2倍或3倍噪音表示)時(shí)進(jìn)入檢測(cè)器的某組分的量(對(duì)濃度型檢測(cè)器指在流動(dòng)相中的濃度——注意與分析方法檢測(cè)限的區(qū)別,單位g/ml或mg/ml;對(duì)質(zhì)量型檢測(cè)器指的是單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測(cè)器的量,單位g/s或mg/s)。又稱(chēng)為敏感度(detectability)。D=2N/S,式中N為噪聲,S為靈敏度。通常是把一個(gè)已知量的標(biāo)準(zhǔn)溶液注入到檢測(cè)器中來(lái)測(cè)定其檢測(cè)限的大小。

檢測(cè)限是檢測(cè)器的一個(gè)主要性能指標(biāo),其數(shù)值越小,檢測(cè)器性能越好。值得注意的是,分析方法的檢測(cè)限除了與檢測(cè)器的噪聲和靈敏度有關(guān)外,還與色譜條件、色譜柱和泵的穩(wěn)定性及各種柱外因素引起的峰展寬有關(guān)。

4)線性范圍:指檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)與組分量成直線關(guān)系的范圍,即在固定靈敏度下,最大與最小進(jìn)樣量(濃度型檢測(cè)器為組分在流動(dòng)相中的濃度)之比。也可用響應(yīng)信號(hào)的最大與最小的范圍表示。

定量分析的準(zhǔn)確與否,關(guān)鍵在于檢測(cè)器所產(chǎn)生的信號(hào)是否與被測(cè)樣品的量始終呈一定的函數(shù)關(guān)系。輸出信號(hào)與樣品量最好呈線性關(guān)系,這樣進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)既準(zhǔn)確又方便。但實(shí)際上沒(méi)有一臺(tái)檢測(cè)器能在任何范圍內(nèi)呈線性響應(yīng)。通常A=BCx,B為響應(yīng)因子,當(dāng)x=1時(shí),為線性響應(yīng)。對(duì)大多數(shù)檢測(cè)器來(lái)說(shuō),x只在一定范圍內(nèi)才接近于1,實(shí)際上通常只要x=0.98~1.02就認(rèn)為它是呈線性的。

線性范圍一般可通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。我們希望檢測(cè)器的線性范圍盡可能大些,能同時(shí)測(cè)定主成分和痕量成分。此外還要求池體積小,受溫度和流速的影響小,能適合梯度洗脫檢測(cè)等。

5)池體積:除制備色譜外,大多數(shù)HPLC檢測(cè)器的池體積都小于10μl。在使用細(xì)管徑柱時(shí),池體積應(yīng)減少到1~2μl甚至更低,不然檢測(cè)系統(tǒng)帶來(lái)的峰擴(kuò)張問(wèn)題就會(huì)很?chē)?yán)重。而且這時(shí)池體、檢測(cè)器與色譜柱的連接、接頭等都要精心設(shè)計(jì),否則會(huì)嚴(yán)重影響柱效和靈敏度。



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